Pine nematode jẹ́ endoparasite ìṣíkiri tí a mọ̀ sí ìyasọtọ tí a mọ̀ sí èyí tí ó ń fa àdánù ọrọ̀ ajé ńlá nínú àwọn àyíká igbó pine. Ìwádìí yìí ṣe àtúnyẹ̀wò ìṣiṣẹ́ nematicidal ti halogenated indoles lòdì sí pine nematodes àti ìlànà ìṣiṣẹ́ wọn. Àwọn ìṣiṣẹ́ nematicidal ti 5-iodoindole àti avermectin (ìṣàkóso rere) lòdì sí pine nematodes jọra wọ́n sì ga ní ìwọ̀n kékeré (10 μg/mL). 5-iodoindole dín ìbímọ kù, ìṣiṣẹ́ ìbímọ, ikú ọmọ inú àti ìgbẹ́, àti ìwà locomotor. Ìbáṣepọ̀ molikula ti àwọn ligands pẹ̀lú àwọn olugba ikanni chloride glutamate-gated invertebrate ṣe àtìlẹ́yìn fún èrò náà pé 5-iodoindole, bíi avermectin, so mọ́ ibi tí olugba ń ṣiṣẹ́ dáadáa. 5-Iodoindole tún fa onírúurú àbùkù phenotypic nínú àwọn nematodes, títí bí ìwópalẹ̀ ara aláìdọ́gba/ìdínkù àti ìbísí tí ó pọ̀ sí i. Àwọn èsì wọ̀nyí fihàn pé àwọn vacuoles lè kó ipa nínú ikú tí nematode methylation ṣe. Ní pàtàkì, 5-iodoindole kò léwu sí àwọn irú ewéko méjèèjì (ẹ̀fọ́ àti radish). Nítorí náà, ìwádìí yìí fihàn pé lílo iodoindole lábẹ́ àwọn ipò àyíká lè ṣàkóso ìpalára pine wilt.
Nematode igi Pine (Bursaphelenchus xylophilus) jẹ́ ti awọn nematodes igi Pine (PWN), awọn nematodes endoparasitic ti o nrìn kiri ti a mọ lati fa ibajẹ ayika nla si awọn eto-aye igbo Pine1. Arun wilt ti igi Pine fa (PWD) ti n di iṣoro nla ni ọpọlọpọ awọn kọntinia, pẹlu Asia ati Yuroopu, ati ni Ariwa Amẹrika, nematode n pa awọn eya pine ti a ti ṣafihan run1,2. Idinku igi Pine jẹ iṣoro eto-ọrọ pataki, ati pe ireti itankale agbaye rẹ jẹ ohun ti o ni idamu3. Awọn eya pine wọnyi ni nematode maa n kọlu julọ: Pinus densiflora, Pinus sylvestris, Pinus thunbergii, Pinus koraiensis, Pinus thunbergii, Pinus thunbergii, ati Pinus radiata4. Pine nematode jẹ arun to lewu ti o le pa awọn igi Pine laarin awọn ọsẹ tabi oṣu ti ikolu naa. Ni afikun, awọn ibesile pine nematode wọpọ ni ọpọlọpọ awọn eto-aye, nitorinaa awọn ẹwọn ikolu ti o tẹsiwaju ti wa tẹlẹ1.
Bursaphelenchus xylophilus jẹ́ nematode onípara-ẹ̀jẹ̀ tí ó jẹ́ ti ìdílé Aphelenchoidea àti clade 102.5. Nematode náà ń jẹ olú ó sì ń bí sí i nínú àwọn àsopọ̀ igi igi pine, ó ń dàgbàsókè sí àwọn ìpele ìdín mẹ́rin: L1, L2, L3, L4 àti ẹni tó dàgbàsókè 1,6. Lábẹ́ àìtó oúnjẹ, nematode pine náà ń kọjá lọ sí ìpele ìdín pàtàkì kan - dauer, èyí tí ó ń sọ ìdènà rẹ̀ di parasitize - igi pine bark beetle (Monochamus alternatus) tí a sì ń gbé lọ sí àwọn igi pine tí ó ní ìlera. Nínú àwọn olùgbàlejò tí ó ní ìlera, nematodes yára máa ń rìn kiri nípasẹ̀ àwọn àsopọ̀ igi wọ́n sì máa ń jẹ àwọn sẹ́ẹ̀lì parenchymatous, èyí tí ó ń yọrí sí ọ̀pọ̀lọpọ̀ àwọn ìṣesí hypersensitivity, yíyọ́ igi pine àti ikú láàrín ọdún kan lẹ́yìn àkóràn1,7,8.
Ìṣàkóso àwọn ohun alààyè ti pine nematodes ti jẹ́ ìpèníjà fún ìgbà pípẹ́, pẹ̀lú àwọn ìgbésẹ̀ ìyàsọ́tọ̀ láti ọ̀rúndún ogún. Àwọn ọgbọ́n ìlò lọ́wọ́lọ́wọ́ fún ṣíṣàkóso àwọn pine nematodes ní pàtàkì ní ìtọ́jú kẹ́míkà, títí bí fífi igi rún àti fífi àwọn nematicides sínú àwọn igi. Àwọn nematicides tí a sábà máa ń lò jùlọ ni avermectin àti avermectin benzoate, tí ó jẹ́ ti ìdílé avermectin. Àwọn kẹ́míkà olówó gọbọi wọ̀nyí munadoko gidigidi sí ọ̀pọ̀lọpọ̀ àwọn ẹranko nematode àti pé a kà wọ́n sí ààbò fún àyíká. Síbẹ̀síbẹ̀, lílo àwọn nematicides wọ̀nyí léraléra ni a retí pé yóò dá ìfúnpá yíyàn tí yóò fẹ́rẹ̀ẹ́ yọrí sí ìfarahàn àwọn pine nematodes tí ó le koko, gẹ́gẹ́ bí a ti fihàn fún ọ̀pọ̀lọpọ̀ àwọn kòkòrò, bíi Leptinotarsa decemlineata, Plutella xylostella àti àwọn nematodes Trichostrongylus colubriformis àti Ostertagia circumcincta, tí wọ́n ti ń ní agbára díẹ̀díẹ̀ sí avermectins10,11,12. Nítorí náà, a nílò kí a máa kẹ́kọ̀ọ́ àwọn ìlànà ìdènà déédéé àti kí a máa ṣe àyẹ̀wò àwọn nematicides nígbà gbogbo láti rí àwọn ìgbésẹ̀ mìíràn, tí ó munadoko àti tí ó ba àyíká jẹ́ láti ṣàkóso PVD. Ní àwọn ọdún àìpẹ́ yìí, ọ̀pọ̀ àwọn òǹkọ̀wé ti dábàá lílo àwọn ohun ọ̀gbìn, àwọn epo pàtàkì àti àwọn ohun tí ó lè fa àyípadà gẹ́gẹ́ bí àwọn ohun tí ń ṣàkóso nematode13,14,15,16.
Láìpẹ́ yìí, a fi ìṣiṣẹ́ nematicidal ti indole, molecule intercellular àti interkingdom signaling molecule, hàn nínú Caenorhabditis elegans 17. Indole jẹ́ àmì intracellular tó gbòòrò nínú ìmọ̀ ẹ̀rọ microbial, tó ń ṣàkóso ọ̀pọ̀lọpọ̀ iṣẹ́ tó ní ipa lórí ìṣiṣẹ́ microbial physiology, ìṣẹ̀dá spore, ìdúróṣinṣin plasmid, resistance oògùn, ìṣẹ̀dá biofilm, àti virulence 18, 19. A kò tíì ṣe ìwádìí nípa ìṣiṣẹ́ indole àti àwọn ohun tó yọrí sí i lòdì sí àwọn pathogenic nematodes mìíràn. Nínú ìwádìí yìí, a ṣe ìwádìí nípa ìṣiṣẹ́ nematicidal ti indoles 34 lòdì sí pine nematodes, a sì ṣàlàyé bí iṣẹ́ ti 5-iodoindole tó lágbára jùlọ ṣe nípa lílo microscopy, fọ́tò àkókò, àti àwọn àyẹ̀wò molecular docking, a sì ṣe àyẹ̀wò àwọn ipa majele rẹ̀ lórí àwọn ewéko nípa lílo àyẹ̀wò ìbísí irugbin.
Àwọn ìpele gíga (>1.0 mM) ti indole ni a ti ròyìn tẹ́lẹ̀ pé ó ní ipa nematicidal lórí nematodes17. Lẹ́yìn ìtọ́jú B. xylophilus (àwọn ìpele ìgbésí ayé àdàpọ̀) pẹ̀lú indole tàbí 33 onírúurú indole derivatives ní 1 mM, a wọn ikú B. xylophilus nípa kíkà àwọn nemotodes alààyè àti òkú nínú àwọn ẹgbẹ́ ìṣàkóso àti àwọn ẹgbẹ́ tí a tọ́jú. Indoles márùn-ún fi agbára nematicial hàn; ìwàláàyè ẹgbẹ́ ìṣàkóso tí a kò tọ́jú jẹ́ 95 ± 7% lẹ́yìn wákàtí 24. Nínú àwọn indoles 34 tí a dán wò, 5-iodoindole àti 4-fluoroindole ní 1 mM fa ikú 100%, nígbà tí 5,6-difluoroindigo, methylindole-7-carboxylate, àti 7-iodoindole fa ikú tó tó 50% (Táblì 1).
Ipa ti 5-iodoindole lori dida vacuole ati iṣelọpọ ti nematode igi pine. (A) Ipa ti avermectin ati 5-iodoindole lori awọn nematode akọ agbalagba, (B) Awọn ẹyin nematode ipele L1 ati (C) iṣelọpọ ti B. xylophilus, (i) a ko ṣe akiyesi awọn vacuoles ni wakati 0, itọju naa yorisi (ii) awọn vacuoles, (iii) ikojọpọ ti awọn vacuoles pupọ, (iv) wiwu ti awọn vacuoles, (v) idapọ ti awọn vacuoles ati (vi) ṣiṣẹda awọn vacuoles nla. Awọn ọfà pupa tọka si wiwu ti awọn vacuoles, awọn ọfà buluu tọka si idapọ ti awọn vacuoles ati awọn ọfà dudu tọka si awọn vacuoles nla. Iwọn iwọn = 50 μm.
Ní àfikún, ìwádìí yìí tún ṣàlàyé ìlànà ìtẹ̀léra ikú tí methane fà nínú pine nematodes (Àwòrán 4C). Ikú methanogenic jẹ́ irú ikú sẹ́ẹ̀lì tí kìí ṣe apoptotic tí ó níí ṣe pẹ̀lú ìkójọpọ̀ àwọn cytoplasmic vacuoles pàtàkì27. Àwọn àbùkù ìrísí tí a rí nínú pine nematodes dàbí ẹni pé ó níí ṣe pẹ̀lú ìlànà ikú tí methane fà. Ìwádìí microscopic ní àwọn àkókò ọ̀tọ̀ọ̀tọ̀ fihàn pé àwọn vacuoles ńlá ni a ṣẹ̀dá lẹ́yìn wákàtí 20 ti ìfarahàn sí 5-iodoindole (0.1 mM). A ṣe àkíyèsí àwọn vacuoles microscopic lẹ́yìn wákàtí 8 ti ìtọ́jú, iye wọn sì pọ̀ sí i lẹ́yìn wákàtí 12. A ṣe àkíyèsí ọ̀pọ̀lọpọ̀ àwọn vacuoles ńlá lẹ́yìn wákàtí 14. Ọ̀pọ̀ àwọn vacuoles tí a yọ́ pọ̀ ni a rí kedere lẹ́yìn wákàtí 12–16 ti ìtọ́jú, èyí tí ó fihàn pé ìfọ́pọ̀ vacuole ni ìpìlẹ̀ ètò ikú methanogenic. Lẹ́yìn wákàtí 20, a rí ọ̀pọ̀lọpọ̀ àwọn vacuoles ńláńlá jákèjádò kòkòrò náà. Àwọn àkíyèsí wọ̀nyí dúró fún ìròyìn àkọ́kọ́ ti metuosis nínú C. elegans.
Nínú àwọn kòkòrò tí a fi iodoindole tọ́jú márùn-ún, a tún rí àkópọ̀ àti ìfọ́ nínú vacuole (Àwòrán 5), gẹ́gẹ́ bí a ṣe rí i nípa títẹ̀ kòkòrò àti ìtújáde vacuole sínú àyíká. A tún rí ìdàrúdàpọ̀ vacuole nínú àwọ̀ ẹyin, èyí tí L2 sábà máa ń pa mọ́ nígbà tí ó bá ń yọ (Àfikún Àwòrán S2). Àwọn àkíyèsí wọ̀nyí ń ṣètìlẹ́yìn fún ìkójọpọ̀ omi àti ìkùnà osmoregulatory, àti ìpalára sẹ́ẹ̀lì tí a lè yí padà (RCI), nínú ìlànà ìṣẹ̀dá vacuole àti ìfàsẹ́yìn (Àwòrán 5).
Ní ṣíṣe àgbéyẹ̀wò ipa tí iodine ní nínú ìṣẹ̀dá vacuole tí a rí, a ṣe ìwádìí ìṣiṣẹ́ nematicidal ti sodium iodide (NaI) àti potassium iodide (KI). Síbẹ̀síbẹ̀, ní ìpele (0.1, 0.5 tàbí 1 mM), wọn kò ní ipa lórí ìgbẹ̀san nematode tàbí ìṣẹ̀dá vacuole (Àfikún Àwòrán S5), bó tilẹ̀ jẹ́ pé 1 mM KI ní ipa nematicidal díẹ̀. Ní ọwọ́ kejì ẹ̀wẹ̀, 7-iodoindole (1 tàbí 2 mM), bíi 5-iodoindole, fa ọ̀pọ̀lọpọ̀ vacuoles àti àwọn ìyípadà ìṣètò (Àfikún Àwòrán S6). Àwọn iodoindoles méjèèjì fi àwọn ànímọ́ phenotypic tí ó jọra hàn nínú pine nematodes, nígbà tí NaI àti KI kò ṣe bẹ́ẹ̀. Lọ́nà tí ó yani lẹ́nu, indole kò fa ìṣẹ̀dá vacuole nínú B. xylophilus ní àwọn ìpele tí a dán wò (ìwádìí kò hàn). Nítorí náà, àwọn àbájáde náà fìdí múlẹ̀ pé ìpele indole-iodine ló fa ìfàsẹ́yìn àti ìṣẹ̀dá B. xylophilus.
Láàrín àwọn indoles tí a dán wò fún ìṣiṣẹ́ nematicial, 5-iodoindole ní àtọ́ka slip tó ga jùlọ ti -5.89 kcal/mol, lẹ́yìn náà ni 7-iodoindole (-4.48 kcal/mol), 4-fluoroindole (-4.33), àti indole (-4.03) (Àwòrán 6). Ìsopọ̀ hydrogen tó lágbára ti 5-iodoindole sí leucine 218 mú kí ìsopọ̀ rẹ̀ dúró ṣinṣin, nígbà tí gbogbo àwọn indole mìíràn tí a dán wò so mọ́ serine 260 nípasẹ̀ ẹ̀gbẹ́ ìdè hydrogen. Láàrín àwọn iodoindoles míràn tí a ṣe àwòṣe, 2-iodoindole ní iye ìsopọ̀mọ́ra ti -5.248 kcal/mol, èyí tí ó jẹ́ nítorí ìsopọ̀mọ́ra hydrogen pàtàkì rẹ̀ pẹ̀lú leucine 218. Àwọn ìsopọ̀mọ́ra míràn tí a mọ̀ pẹ̀lú ni 3-iodoindole (-4.3 kcal/mol), 4-iodoindole (-4.0 kcal/mol), àti 6-fluoroindole (-2.6 kcal/mol) (Àfikún Àwòrán S8). Pupọ julọ awọn indoles halogenated ati indole funrararẹ, ayafi 5-iodoindole ati 2-iodoindole, ṣe asopọ pẹlu serine 260. Otitọ pe isopọ hydrogen pẹlu leucine 218 jẹ itọkasi ti isopọ olugba-ligand ti o munadoko, gẹgẹbi a ti ṣe akiyesi fun ivermectin (Afikun Fig. S7), jẹrisi pe 5-iodoindole ati 2-iodoindole, bii ivermectin, so mọ aaye ti nṣiṣe lọwọ ti olugba GluCL nipasẹ leucine 218 (Fig. 6 ati Fig. S8 Afikun). A daba pe asopọ yii nilo lati ṣetọju eto iho ti o ṣii ti eka GluCL ati pe nipa dipọ mọ aaye ti nṣiṣe lọwọ ti olugba GluCL, 5-iodoindole, 2-iodoindole, avermectin ati ivermectin nitorinaa ṣetọju ikanni ion ṣii ati gba gbigba omi laaye.
Ìdè indole àti halogenated indole mọ́ GluCL. Àwọn ìtọ́sọ́nà ìsopọ̀ ti (A) indole, (B) 4-fluoroindole, (C) 7-iodoindole, àti (D) 5-iodoindole ligands sí ibi tí GluCL ń ṣiṣẹ́. A fi rìbọ́n ṣe àfihàn amuaradagba náà, a sì fi àwọn ìdè hydrogen ẹ̀yìn hàn gẹ́gẹ́ bí àwọn ìlà oníwọ̀n ofeefee. (A′), (B′), (C′), àti (D′) fi ìbáṣepọ̀ àwọn ligands tí ó báramu pẹ̀lú àwọn amino acid tí ó yí i ká hàn, àti àwọn ìdè hydrogen ẹ̀gbẹ́ ni a fi àwọn ọfà oníwọ̀n pupa hàn.
Àwọn àyẹ̀wò ni a ṣe láti ṣe àyẹ̀wò ipa majele ti 5-iodoindole lórí ìbísí èso kabeeji àti radish. 5-iodoindole (0.05 tàbí 0.1 mM) tàbí avermectin (10 μg/mL) kò ní ipa díẹ̀ tàbí kò ní ipa kankan lórí ìbísí ìbẹ̀rẹ̀ àti ìfarahàn plantlet (Àwòrán 7). Ní àfikún, a kò rí ìyàtọ̀ pàtàkì láàárín ìwọ̀n ìbísí ti àwọn ìṣàkóso tí a kò tọ́jú àti àwọn irugbin tí a fi 5-iodoindole tàbí avermectin tọ́jú. Ipa lórí ìtẹ̀síwájú taproot àti iye àwọn gbòǹgbò ẹ̀gbẹ́ tí a dá kò tó nǹkan, bó tilẹ̀ jẹ́ pé 1 mM (ìlọ́po mẹ́wàá ìfojúsùn rẹ̀) ti 5-iodoindole dá ìdàgbàsókè àwọn gbòǹgbò ẹ̀gbẹ́ dúró díẹ̀. Àwọn àbájáde wọ̀nyí fihàn pé 5-iodoindole kò léwu sí àwọn sẹ́ẹ̀lì igi, kò sì dí àwọn ìlànà ìdàgbàsókè igi lọ́wọ́ ní àwọn ìfojúsùn tí a kẹ́kọ̀ọ́.
Ipa ti 5-iodoindole lori idagbasoke irugbin. Igbin, idagbasoke ati gbongbo ẹgbẹ ti awọn irugbin B. oleracea ati R. raphanistrum lori alabọde Murashige ati Skoog agar pẹlu tabi laisi avermectin tabi 5-iodoindole. A ṣe igbasilẹ idagbasoke lẹhin ọjọ mẹta ti dida ni 22°C.
Ìwádìí yìí ròyìn ọ̀pọ̀lọpọ̀ ọ̀ràn pípa nematode nípasẹ̀ indoles. Èyí ni ìròyìn àkọ́kọ́ nípa iodoindole tó ń fa methylation (ìlànà kan tí ìkójọpọ̀ àwọn vacuoles kékeré tí ó ń para pọ̀ di àwọn vacuoles ńláńlá, tí ó sì ń yọrí sí ìfọ́ awọ ara àti ikú nígbẹ̀yìn gbẹ́yín) nínú abẹ́rẹ́ pine, pẹ̀lú iodoindole tí ó ń fi àwọn ohun ìní nematicide pàtàkì hàn bí ti nematicide avermectin ti ìṣòwò.
A ti royin tẹlẹ pe Indoles ni ọpọlọpọ awọn iṣẹ ifihan agbara ninu awọn prokaryotes ati awọn eukaryotes, pẹlu idena/ìṣẹ̀dá biofilm, iwalaaye kokoro arun, ati pathogenicity19,32,33,34. Laipẹ yii, awọn ipa itọju ti o ṣeeṣe ti awọn indoles halogenated, awọn alkaloids indole, ati awọn itọsẹ indole semisynthetic ti fa ifamọra iwadii pupọ35,36,37. Fun apẹẹrẹ, a ti fihan pe awọn indoles halogenated pa awọn sẹẹli Escherichia coli ati Staphylococcus aureus ti o duro ṣinṣin37. Ni afikun, o jẹ anfani imọ-jinlẹ lati ṣe iwadi ipa ti awọn indoles halogenated lodi si awọn eya, awọn iran, ati awọn ijọba miiran, ati iwadi yii jẹ igbesẹ si aṣeyọri ibi-afẹde yii.
Níbí, a dámọ̀ràn ìlànà kan fún ikú tí ó fa 5-iodoindole nínú àwọn elegan C. tí ó dá lórí ìpalára sẹ́ẹ̀lì tí a lè yípadà (RCI) àti methylation (Àwòrán 4C àti 5). Àwọn ìyípadà ẹ̀dọ̀ bíi fífọ́ àti ìbàjẹ́ vacuolar jẹ́ àmì RCI àti methylation, tí a fihàn gẹ́gẹ́ bí àwọn vacuoles ńlá nínú cytoplasm48,49. RCI ń dí iṣẹ́ agbára lọ́wọ́ nípa dídín iṣẹ́ ATP kù, ó ń fa ìkùnà ti fifa ATPase, tàbí dí àwọn membranes sẹ́ẹ̀lì lọ́wọ́ àti ó ń fa ìṣàn omi kíákíá ti Na+, Ca2+, àti water50,51,52. Àwọn vacuoles inú cytoplasmic ń dìde nínú àwọn sẹ́ẹ̀lì ẹranko nítorí ìṣàn omi nínú cytoplasm nítorí ìṣàn omi Ca2+ àti water53. Lọ́nà tó yani lẹ́nu, ọ̀nà yìí tí ó ń fa ìbàjẹ́ sẹ́ẹ̀lì lè yípadà tí ìbàjẹ́ náà bá jẹ́ fún ìgbà díẹ̀ tí àwọn sẹ́ẹ̀lì náà sì bẹ̀rẹ̀ sí í ṣe ATP fún àkókò kan pàtó, ṣùgbọ́n tí ìbàjẹ́ náà bá ń bá a lọ tàbí tí ó bá burú sí i, àwọn sẹ́ẹ̀lì náà yóò kú.54 Àwọn àkíyèsí wa fihàn pé àwọn nematodes tí a fi 5-iodoindole tọ́jú kò lè mú kí ìṣẹ̀dá ara padà sípò lẹ́yìn tí a bá fara hàn sí àwọn ipò ìdààmú.
Àwòrán methylation tí 5-iodoindole fà nínú B. xylophilus lè jẹ́ nítorí wíwà iodine àti ìpínkiri molikula rẹ̀, nítorí pé 7-iodoindole ní ipa ìdíwọ́ díẹ̀ lórí B. xylophilus ju 5-iodoindole lọ (Táblì 1 àti Àwòrán Àfikún S6). Àwọn àbájáde wọ̀nyí bá àwọn ìwádìí Maltese àti àwọn ẹlòmíràn (2014) mu díẹ̀, tí wọ́n ròyìn pé ìyípadà pyridyl nitrogen moiety nínú indole láti para- sí ipò meta pa vacuolization, ìdíwọ́ ìdàgbàsókè, àti cytotoxicity nínú àwọn sẹ́ẹ̀lì U251 run, èyí tí ó fihàn pé ìbáṣepọ̀ molikula pẹ̀lú ibi pàtó kan tí ń ṣiṣẹ́ nínú amuaradagba ṣe pàtàkì27,44,45. Àwọn ìbáṣepọ̀ láàrín indole indole tàbí halogenated indoles àti àwọn olugba GluCL tí a ṣàkíyèsí nínú ìwádìí yìí tún ṣètìlẹ́yìn fún èrò yìí, bí a ṣe rí i pé 5- àti 2-iodoindole so mọ́ àwọn olugba GluCL ní agbára ju àwọn indoles mìíràn tí a ṣàyẹ̀wò lọ (Àwòrán 6 àti Àwòrán Àfikún S8). A rí i pé iodine ní ipò kejì tàbí karùn-ún ti indole so mọ́ leucine 218 ti olugba GluCL nípasẹ̀ àwọn ìdè hydrogen backbone, nígbà tí àwọn indoles halogenated mìíràn àti indole fúnra wọn ń ṣe àwọn ìdè hydrogen ẹ̀gbẹ́ aláìlera pẹ̀lú serine 260 (Àwòrán 6). Nítorí náà, a rò pé ibi tí halogen wà kó ipa pàtàkì nínú ìfàsẹ́yìn ìbàjẹ́ vacuolar, nígbà tí ìdè 5-iodoindole tí ó dì mú kí ikanni ion ṣí sílẹ̀, nípa bẹ́ẹ̀ ó ń jẹ́ kí omi kíákíá wọ inú rẹ̀ kí ó sì fọ́ vacuole. Síbẹ̀síbẹ̀, a kò tíì mọ bí a ṣe ń ṣe iṣẹ́ 5-iodoindole.
Kí a tó lo 5-iodoindole lọ́nà tó yẹ, a gbọ́dọ̀ ṣàyẹ̀wò ipa tó léwu tó ní lórí ewéko. Àwọn àyẹ̀wò ìbísí irúgbìn wa fihàn pé 5-iodoindole kò ní ipa búburú kankan lórí ìbísí irúgbìn tàbí àwọn ìlànà ìdàgbàsókè tó tẹ̀lé e ní àwọn ibi tí a kẹ́kọ̀ọ́ (Àwòrán 7). Nítorí náà, ìwádìí yìí pèsè ìpìlẹ̀ fún lílo 5-iodoindole ní àyíká àyíká láti ṣàkóso ìpalára àwọn nematodes pine sí àwọn igi pine.
Àwọn ìròyìn tó ti kọjá ti fi hàn pé ìtọ́jú tí a fi indole ṣe dúró fún ọ̀nà tó ṣeé ṣe láti yanjú ìṣòro àìlèfaradà egbòogi àti ìlọsíwájú àrùn jẹjẹrẹ.55. Ní àfikún, indoles ní àwọn iṣẹ́ antibacterial, anticancer, antioxidant, anti-inflammatory, antidiabetic, antiviral, antiproliferative àti antituberculosis, ó sì lè jẹ́ ìpìlẹ̀ tó dájú fún ìdàgbàsókè oògùn56,57. Ìwádìí yìí dámọ̀ràn fún ìgbà àkọ́kọ́ pé a lè lo iodine gẹ́gẹ́ bí ohun èlò antiparasitic àti antihelmintic.
Wọ́n ṣàwárí Avermectin ní ọgbọ̀n ọdún sẹ́yìn, ó sì gba Ẹ̀bùn Nobel ní ọdún 2015, lílò rẹ̀ gẹ́gẹ́ bí ohun tí ó ń pa kòkòrò sì ń lọ lọ́wọ́lọ́wọ́. Síbẹ̀síbẹ̀, nítorí ìdàgbàsókè kíákíá ti ìdènà sí avermectins nínú àwọn nematodes àti àwọn kòkòrò kòkòrò, a nílò ọ̀nà mìíràn, tí ó rọrùn, tí ó sì jẹ́ ti àyíká láti ṣàkóso àkóràn PWN nínú àwọn igi pine. Ìwádìí yìí tún ròyìn ọ̀nà tí 5-iodoindole fi ń pa àwọn pine nematodes àti pé 5-iodoindole ní ìpalára díẹ̀ sí àwọn sẹ́ẹ̀lì igi, èyí tí ó ṣí àwọn àǹfààní rere sílẹ̀ fún lílò rẹ̀ ní ọjọ́ iwájú.
Gbogbo àwọn ìdánwò ni Ìgbìmọ̀ Ìwà-bí-Ọlọ́run ti Yunifásítì Yeungnam, Gyeongsan, Korea fọwọ́ sí, wọ́n sì ṣe àwọn ọ̀nà náà ní ìbámu pẹ̀lú ìlànà Ìgbìmọ̀ Ìwà-bí-Ọlọ́run ti Yunifásítì Yeungnam.
A ṣe àwọn àdánwò ìfàmọ́ra ẹyin nípa lílo àwọn ìlànà tí a ti gbé kalẹ̀43. Láti ṣe àyẹ̀wò ìwọ̀n ìfàmọ́ra ẹyin (HR), a gbé àwọn nematode àgbàlagbà ọjọ́ kan (tó tó 100 obìnrin àti 100 ọkùnrin) lọ sí àwọn oúnjẹ Petri tí ó ní olu náà, a sì jẹ́ kí wọ́n dàgbà fún wákàtí 24. Lẹ́yìn náà, a ya àwọn ẹyin sọ́tọ̀, a sì fi 5-iodoindole (0.05 mM àti 0.1 mM) tàbí avermectin (10 μg/ml) tọ́jú wọn gẹ́gẹ́ bí ìfàmọ́ra nínú omi tí a ti sọ di mímọ́. A gbé àwọn ìfàmọ́ra wọ̀nyí (500 μl; tó tó 100 ẹyin) lọ sí àwọn ihò ti àwo ìṣẹ̀dá àsopọ̀ 24 tí a sì fi sínú ihò ní 22 °C. A ṣe iye L2 lẹ́yìn wákàtí 24 ìfàmọ́ra ṣùgbọ́n a kà wọ́n sí òkú bí àwọn sẹ́ẹ̀lì náà kò bá ṣí nígbà tí a bá fi wáyà platinum dídán kan tàn án jẹ. A ṣe àdánwò yìí ní ìpele méjì, ọ̀kọ̀ọ̀kan pẹ̀lú àtúnṣe mẹ́fà. A pa àwọn dátà láti inú àwọn àdánwò méjèèjì pọ̀, a sì gbé wọn kalẹ̀. A ṣírò ìpín HR gẹ́gẹ́ bí èyí:
A ṣe àyẹ̀wò ikú ìdin nípa lílo àwọn ìlànà tí a ti ṣe tẹ́lẹ̀. A kó ẹyin Nematode jọ, a sì so àwọn ọmọ inú rẹ̀ pọ̀ nípa lílo omi tí a ti yọ kúrò nínú omi tí a ti yọ kúrò láti mú ìdin L2 jáde. A fi 5-iodoindole (0.05 mM àti 0.1 mM) tàbí avermectin (10 μg/ml) tọ́jú àwọn ìdin tí a ti yípadà (tó tó 500 nematodes) tí a sì gbìn wọ́n sórí àwọn àwo B. cinerea Petri. Lẹ́yìn wákàtí 48 tí a fi gún wọn ní 22 °C, a kó àwọn nematode jọ sínú omi tí a ti yọ kúrò nínú omi tí a ti yọ kúrò nínú omi tí a ti yọ kúrò nínú omi tí a sì ṣe àyẹ̀wò fún wíwà àwọn ìpele L2, L3, àti L4. Wíwà àwọn ìpele L3 àti L4 fi hàn pé ìyípadà ìdin wà, nígbà tí wíwà ìpele L2 kò fi hàn pé ìyípadà wà. A gba àwọn àwòrán nípa lílo iRiS™ Digital Cell Imaging System. A ṣe ìdánwò yìí ní ìpele méjì, ọ̀kọ̀ọ̀kan pẹ̀lú àtúnṣe mẹ́fà. A pa àwọn dátà láti inú àwọn ìdánwò méjèèjì pọ̀, a sì gbé wọn kalẹ̀.
A ṣe àyẹ̀wò ìpalára 5-iodoindole àti avermectin sí irúgbìn nípa lílo àwọn ìdánwò ìbímọ lórí àwọn àwo agar Murashige àti Skoog.62 A kọ́kọ́ fi àwọn irúgbìn oleracea àti R. raphanistrum sínú omi tí a ti fọ̀ mọ́ fún ọjọ́ kan, a fi ethanol 1 ml 100% fọ̀ wọ́n, a fi bleach 1 ml 50% ti ọjà (3% sodium hypochlorite) fọ̀ wọ́n mọ́ fún ìṣẹ́jú 15, a sì fi omi tí a ti fọ̀ mọ́ wọn nígbà márùn-ún. A tẹ̀ àwọn irúgbìn tí a ti fọ̀ mọ́ àwọn àwo agar ìbímọ tí ó ní 0.86 g/l (0.2X) Murashige àti Skoog medium àti 0.7% agar bacteriological pẹ̀lú tàbí láìsí 5-iodoindole tàbí avermectin. Lẹ́yìn náà, a fi àwọn àwo náà sínú 22 °C, a sì ya àwòrán lẹ́yìn ọjọ́ mẹ́ta tí a ti yọ́ mọ́ wọn. A ṣe ìdánwò yìí ní ìpele méjì, ọ̀kọ̀ọ̀kan wọn ní àtúnṣe mẹ́fà.
Àkókò ìfìwéránṣẹ́: Feb-26-2025