Larvicidal ati iṣẹ antitermite ti microbial biosurfactants ti a ṣe nipasẹ Enterobacter cloacae SJ2 ti o ya sọtọ lati sponge Clathria sp.

Lilo ibigbogbo ti awọn ipakokoropaeku sintetiki ti yori si ọpọlọpọ awọn iṣoro, pẹlu ifarahan ti awọn oganisimu sooro, ibajẹ ayika ati ipalara si ilera eniyan.Nitorina, titun makirobiaipakokoropaekuti o jẹ ailewu fun ilera eniyan ati ayika ni a nilo ni kiakia.Ninu iwadi yii, biosurfactant rhamnolipid ti a ṣe nipasẹ Enterobacter cloacae SJ2 ni a lo lati ṣe iṣiro majele si efon (Culex quinquefasciatus) ati awọn idin termite (Odontotermes obesus).Awọn abajade fihan pe oṣuwọn iku ti o gbẹkẹle iwọn lilo wa laarin awọn itọju.Iwọn LC50 (50% ifọkansi apaniyan) ni awọn wakati 48 fun termite ati awọn ohun elo elere-ẹfin ti ẹ̀fọn ni a pinnu nipa lilo ọna ibaamu ipadasẹhin aiṣedeede.Awọn abajade fihan pe awọn iye LC50-wakati 48 (95% aarin igbẹkẹle) ti larvicidal ati iṣẹ antitermite ti biosurfactant jẹ 26.49 mg / L (iwọn 25.40 si 27.57) ati 33.43 mg / L (iwọn 31.09 si 35.68)Gẹgẹbi idanwo itan-akọọlẹ, itọju pẹlu biosurfactants fa ibajẹ nla si awọn sẹẹli ara ti awọn idin ati awọn termites.Awọn abajade iwadi yii tọka pe biosurfactant microbial ti a ṣe nipasẹ Enterobacter cloacae SJ2 jẹ ohun elo ti o tayọ ati agbara ti o munadoko fun iṣakoso Cx.quinquefasciatus ati O. obesus.
Awọn orilẹ-ede Tropical ni iriri nọmba nla ti awọn aarun ti o jẹ ti ẹfọn1.Ibaraẹnisọrọ ti awọn arun ti o jẹ ti ẹfọn jẹ ibigbogbo.Die e sii ju 400,000 eniyan ku lati ibà ni ọdun kọọkan, ati diẹ ninu awọn ilu pataki ti n ni iriri awọn ajakale-arun ti awọn aisan to ṣe pataki gẹgẹbi dengue, yellow fever, chikungunya ati Zika.2 Awọn arun ti o niiṣe pẹlu Vector ni nkan ṣe pẹlu ọkan ninu awọn akoran mẹfa ni agbaye, pẹlu awọn ẹfọn ti o nfa julọ julọ. awọn ọran pataki3,4.Culex, Anopheles ati Aedes jẹ ẹya ẹfọn mẹta ti o wọpọ julọ pẹlu gbigbe arun5.Itankale ti iba dengue, akoran ti o tan kaakiri nipasẹ ẹfọn Aedes aegypti, ti pọ si ni ọdun mẹwa sẹhin ati pe o jẹ eewu ilera ilera gbogbogbo4,7,8.Gẹgẹbi Ajo Agbaye ti Ilera (WHO), diẹ sii ju 40% ti awọn olugbe agbaye wa ninu eewu iba iba dengue, pẹlu 50-100 milionu awọn ọran tuntun ti n waye lọdọọdun ni diẹ sii ju awọn orilẹ-ede 1009,10,11.Iba dengue ti di iṣoro ilera ilera gbogbogbo bi iṣẹlẹ rẹ ti pọ si ni kariaye12,13,14.Anopheles gambiae, tí a mọ̀ sí ẹ̀fọn Anopheles ti ilẹ̀ Áfíríkà, jẹ́ èròjà ibà tó ṣe pàtàkì jù lọ nínú àwọn ẹkùn ilẹ̀ olóoru àti abẹ́ ilẹ̀15.Kokoro West Nile, St Louis encephalitis, Japanese encephalitis, ati awọn akoran gbogun ti awọn ẹṣin ati awọn ẹiyẹ ni a gbejade nipasẹ awọn ẹfọn Culex, ti a npe ni awọn ẹfọn ile ti o wọpọ.Ní àfikún, wọ́n tún jẹ́ amúnilọ́wọ́gbà ti kòkòrò àrùn àti àwọn àrùn parasitic16.Nibẹ ni o ju 3,000 eya ti termites ni agbaye, ati pe wọn ti wa ni ayika fun ọdun 150 milionu17.Pupọ julọ awọn ajenirun n gbe inu ile ati jẹun lori igi ati awọn ọja igi ti o ni cellulose ninu.Òkúrò India Odontotermes obesus jẹ́ kòkòrò tó ṣe pàtàkì tó máa ń fa ìbàjẹ́ ńláǹlà sí àwọn ohun ọ̀gbìn pàtàkì àti àwọn igi gbingbin18.Ni awọn agbegbe iṣẹ-ogbin, awọn ipakokoro ti o wa ni ọpọlọpọ awọn ipele le fa ibajẹ ọrọ-aje nla si ọpọlọpọ awọn irugbin, iru igi ati awọn ohun elo ile.Awọn aja tun le fa awọn iṣoro ilera eniyan19.
Oro ti resistance lati microorganisms ati ajenirun ni oni elegbogi ati ogbin oko ni complex20,21.Nitorinaa, awọn ile-iṣẹ mejeeji yẹ ki o wa awọn antimicrobials ti o munadoko-owo titun ati awọn biopesticides ailewu.Awọn ipakokoropaeku sintetiki ti wa ni bayi ati pe o ti fihan pe o jẹ akoran ati pe o le kọ awọn kokoro anfani ti ko ni ibi-afẹde22.Ni awọn ọdun aipẹ, iwadii lori biosurfactants ti pọ si nitori ohun elo wọn ni awọn ile-iṣẹ lọpọlọpọ.Biosurfactants wulo pupọ ati pataki ni iṣẹ-ogbin, atunṣe ile, isediwon epo, kokoro arun ati yiyọ kokoro, ati ṣiṣe ounjẹ23,24.Biosurfactants tabi microbial surfactants jẹ awọn kemikali biosurfactant ti a ṣe nipasẹ awọn microorganisms bii kokoro arun, iwukara ati elu ni awọn ibugbe eti okun ati awọn agbegbe ti doti epo25,26.Awọn surfactants ti a mu ni kemikali ati awọn biosurfactants jẹ oriṣi meji ti o gba taara lati agbegbe adayeba27.Orisirisi biosurfactants ti wa ni gba lati tona ibugbe28,29.Nitorinaa, awọn onimo ijinlẹ sayensi n wa awọn imọ-ẹrọ tuntun fun iṣelọpọ ti biosurfactants ti o da lori kokoro-arun adayeba30,31.Awọn ilọsiwaju ninu iru iwadi ṣe afihan pataki ti awọn agbo ogun ti ibi wọnyi fun aabo ayika32.Bacillus, Pseudomonas, Rhodococcus, Alcaligenes, Corynebacterium ati awọn kokoro-arun wọnyi jẹ awọn aṣoju ti a ṣe iwadi daradara23,33.
Ọpọlọpọ awọn oriṣi ti biosurfactants wa pẹlu ọpọlọpọ awọn ohun elo34.Anfani pataki ti awọn agbo ogun wọnyi ni pe diẹ ninu wọn ni iṣẹ ṣiṣe antibacterial, larvicidal ati insecticidal.Eyi tumọ si pe wọn le ṣee lo ni iṣẹ-ogbin, kemikali, oogun ati awọn ile-iṣẹ ohun ikunra35,36,37,38.Nitoripe biosurfactants ni gbogbo igba jẹ ibajẹ ati anfani ayika, wọn lo ninu awọn eto iṣakoso kokoro lati daabobo awọn irugbin39.Nitorinaa, a ti gba oye ipilẹ nipa iṣẹ larvicidal ati antitermite ti microbial biosurfactants ti a ṣe nipasẹ Enterobacter cloacae SJ2.A ṣe ayẹwo iku ati awọn iyipada itan-akọọlẹ nigbati o farahan si awọn ifọkansi oriṣiriṣi ti awọn biosurfactants rhamnolipid.Ní àfikún, a ṣe àgbéyẹ̀wò ètò ìgbékalẹ̀ ìgbékalẹ̀ ìpilẹ̀ pipo (QSAR) kọ̀ǹpútà tí a ń lò káàkiri
Ninu iwadi yii, iṣẹ-ṣiṣe antitermite (majele ti) ti awọn biosurfactants ti a sọ di mimọ ni orisirisi awọn ifọkansi ti o wa lati 30 si 50 mg / ml (ni awọn aaye arin 5 mg / ml) ni idanwo lodi si awọn terites India, O. obesus ati kẹrin eya ) Ṣe ayẹwo.Idin ti instar Cx.Idin ti efon quinquefasciatus.Awọn ifọkansi Biosurfactant LC50 lori awọn wakati 48 lodi si O. obesus ati Cx.C. solanacearum.A ṣe idanimọ idin ti ẹfọn nipa lilo ọna ti o baamu ti tẹ ifasilẹ ti kii ṣe laini.Awọn abajade fihan pe iku iku ti o pọ si pẹlu jijẹ ifọkansi biosurfactant.Awọn abajade fihan pe biosurfactant ni iṣẹ larvicidal (Nọmba 1) ati iṣẹ-ṣiṣe anti-termite (Figure 2), pẹlu awọn iye LC50 wakati 48 (95% CI) ti 26.49 mg / L (25.40 si 27.57) ati 33.43 mg / l (olusin 31.09 to 35.68), lẹsẹsẹ (Table 1).Ni awọn ofin ti majele nla (wakati 48), biosurfactant jẹ ipin bi “ipalara” si awọn ohun alumọni ti idanwo.Biosurfactant ti a ṣejade ninu iwadi yii ṣe afihan iṣẹ-ṣiṣe larvicidal ti o dara julọ pẹlu 100% iku laarin awọn wakati 24-48 ti ifihan.
Ṣe iṣiro iye LC50 fun iṣẹ larvicidal.Ibamu ti tẹ ifasẹyin ti kii ṣe laini (ila ti o lagbara) ati aarin 95% igbẹkẹle (agbegbe iboji) fun iku ibatan (%).
Ṣe iṣiro iye LC50 fun iṣẹ-ṣiṣe anti-terite.Ibamu ti tẹ ifasẹyin ti kii ṣe laini (ila ti o lagbara) ati aarin 95% igbẹkẹle (agbegbe iboji) fun iku ibatan (%).
Ni ipari idanwo naa, awọn iyipada morphological ati awọn aiṣedeede ni a ṣe akiyesi labẹ maikirosikopu.Awọn iyipada Morphological ni a ṣe akiyesi ni iṣakoso ati awọn ẹgbẹ ti a ṣe itọju ni titobi 40x.Gẹgẹbi a ṣe han ni Nọmba 3, ailagbara idagbasoke waye ni ọpọlọpọ awọn idin ti a tọju pẹlu biosurfactants.Olusin 3a fihan deede Cx.quinquefasciatus, olusin 3b fihan ohun anomalous Cx.O fa idin nematode marun.
Ipa ti sublethal (LC50) awọn iwọn lilo ti biosurfactants lori idagbasoke ti idin Culex quinquefasciatus.Aworan maikirosikopu ina (a) ti Cx deede ni titobi 40×.quinquefasciatus (b) Cx ajeji.O fa idin nematode marun.
Ninu iwadi ti o wa lọwọlọwọ, idanwo itan-akọọlẹ ti awọn idin ti a ṣe itọju (Fig. 4) ati awọn termites (Fig. 5) ṣe afihan ọpọlọpọ awọn ohun ajeji, pẹlu idinku ni agbegbe inu ati ibajẹ si awọn iṣan, awọn ipele epithelial ati awọ ara.midgut.Itan-akọọlẹ ṣe afihan ilana iṣẹ ṣiṣe inhibitory ti biosurfactant ti a lo ninu iwadii yii.
Histopathology ti deede aitọju 4th instar Cx idin.quinquefasciatus idin (iṣakoso: (a,b)) ati itọju pẹlu biosurfactant (itọju: (c,d)).Awọn itọka tọkasi epithelium ifun ti a tọju (epi), awọn arin (n), ati iṣan (mu).Pẹpẹ = 50 µm.
Histopathology ti deede ti ko ni itọju O. obesus (iṣakoso: (a,b)) ati itọju biosurfactant (itọju: (c,d)).Awọn itọka tọkasi epithelium oporoku (epi) ati iṣan (mu), lẹsẹsẹ.Pẹpẹ = 50 µm.
Ninu iwadi yii, a lo ECOSAR lati ṣe asọtẹlẹ majele nla ti awọn ọja biosurfactant rhamnolipid si awọn olupilẹṣẹ akọkọ (ewe alawọ ewe), awọn onibara akọkọ (fleas omi) ati awọn alabara keji (ẹja).Eto yii nlo awọn awoṣe pipo igbekalẹ-ipo fafa lati ṣe iṣiro majele ti o da lori igbekalẹ molikula.Awoṣe naa nlo sọfitiwia iṣẹ-iṣe (SAR) lati ṣe iṣiro majele nla ati igba pipẹ ti awọn nkan si iru omi inu omi.Ni pataki, Tabili 2 ṣe akopọ ifoju awọn ifọkansi apaniyan ti a pinnu (LC50) ati tumọ si awọn ifọkansi ti o munadoko (EC50) fun ọpọlọpọ awọn eya.Majele ti a fura si ni tito lẹšẹšẹ si awọn ipele mẹrin nipa lilo Eto Imudara Agbaye ti Isọdi ati Iforukọsilẹ Awọn Kemikali (Table 3).
Iṣakoso ti awọn arun ti o nfa nipasẹ fekito, paapaa awọn igara ti awọn efon ati awọn ẹfọn Aedes.Awọn ara Egipti, iṣẹ ti o nira ni bayi 40,41,42,43,44,45,46.Botilẹjẹpe diẹ ninu awọn ipakokoropaeku ti kemikali ti o wa, gẹgẹbi awọn pyrethroids ati organophosphates, jẹ anfani diẹ, wọn jẹ awọn eewu pataki si ilera eniyan, pẹlu àtọgbẹ, awọn rudurudu ibisi, awọn rudurudu iṣan, akàn, ati awọn arun atẹgun.Pẹlupẹlu, ni akoko pupọ, awọn kokoro wọnyi le di sooro si wọn13,43,48.Nitorinaa, awọn igbese iṣakoso isedale ti o munadoko ati ore ayika yoo di ọna olokiki diẹ sii ti iṣakoso efon49,50.Benelli51 daba pe iṣakoso ni kutukutu ti awọn olutọpa ẹfọn yoo munadoko diẹ sii ni awọn agbegbe ilu, ṣugbọn wọn ko ṣeduro lilo awọn larvicides ni awọn agbegbe igberiko52.Tom et al 53 tun daba pe iṣakoso awọn efon ni awọn ipele ti ko dagba yoo jẹ ilana ailewu ati rọrun nitori pe wọn ni itara diẹ sii si awọn aṣoju iṣakoso 54.
Ṣiṣejade biosurfactant nipasẹ igara ti o lagbara (Enterobacter cloacae SJ2) ṣe afihan ni ibamu ati imunadoko ileri.Iwadii iṣaaju wa royin pe Enterobacter cloacae SJ2 ṣe iṣapeye iṣelọpọ biosurfactant nipa lilo awọn paramita physicochemical26.Gẹgẹbi iwadi wọn, awọn ipo ti o dara julọ fun iṣelọpọ biosurfactant nipasẹ iyasọtọ E. cloacae ti o pọju jẹ idabobo fun awọn wakati 36, agitation ni 150 rpm, pH 7.5, 37 °C, salinity 1 ppt, 2% glucose bi orisun carbon, 1% iwukara. .a ti lo jade bi orisun nitrogen lati gba 2.61 g/L biosurfactant.Ni afikun, awọn biosurfactants ni a ṣe afihan nipa lilo TLC, FTIR ati MALDI-TOF-MS.Eyi jẹrisi pe rhamnolipid jẹ biosurfactant.Glycolipid biosurfactants jẹ kilasi ti o ni itara julọ ti awọn iru biosurfactants miiran55.Wọn ni awọn ẹya carbohydrate ati ọra, nipataki awọn ẹwọn acid ọra.Lara awọn glycolipids, awọn aṣoju akọkọ jẹ rhamnolipid ati sophorolipid56.Rhamnolipids ni awọn ẹya rhamnose meji ti o ni asopọ si mono- tabi di-β-hydroxydecanoic acid 57.Lilo awọn rhamnolipids ni awọn ile-iṣẹ iṣoogun ati awọn ile-iṣẹ oogun ti ni idasilẹ daradara 58, ni afikun si lilo wọn laipe bi awọn ipakokoropaeku 59.
Ibaraẹnisọrọ ti biosurfactant pẹlu agbegbe hydrophobic ti siphon atẹgun ngbanilaaye omi lati kọja nipasẹ iho stomatal rẹ, nitorinaa jijẹ olubasọrọ ti idin pẹlu agbegbe omi.Iwaju awọn biosurfactants tun ni ipa lori trachea, gigun eyiti o wa nitosi aaye, eyiti o jẹ ki o rọrun fun idin lati ra si oju ati simi.Bi abajade, ẹdọfu dada ti omi dinku.Niwọn igba ti awọn idin ko le somọ si oju omi, wọn ṣubu si isalẹ ti ojò, ti npa titẹ agbara hydrostatic, ti o mu ki inawo agbara ti o pọju ati iku nipasẹ drowning38,60.Awọn abajade ti o jọra ni a gba nipasẹ Ghribi61, nibiti biosurfactant ti o ṣe nipasẹ Bacillus subtilis ṣe afihan iṣẹ ṣiṣe larvicidal lodi si Ephestia kuehniella.Bakanna, iṣẹ larvicidal ti Cx.Das ati Mukherjee23 tun ṣe ayẹwo ipa ti awọn lipopeptides cyclic lori awọn idin quinquefasciatus.
Awọn abajade iwadi yii kan iṣẹ ṣiṣe larvicidal ti rhamnolipid biosurfactants lodi si Cx.Pipa awọn ẹfọn quinquefasciatus ni ibamu pẹlu awọn abajade ti a tẹjade tẹlẹ.Fun apẹẹrẹ, awọn biosurfactants ti o da lori surfactin ti a ṣe nipasẹ ọpọlọpọ awọn kokoro arun ti iwin Bacillus ni a lo.ati Pseudomonas spp.Diẹ ninu awọn ijabọ kutukutu 64,65,66 ṣe ijabọ iṣẹ-pipa idin ti awọn biosurfactants lipopeptide lati Bacillus subtilis23.Deepali et al.63 rii pe biosurfactant rhamnolipid ti o ya sọtọ lati Stenotropomonas maltophilia ni iṣẹ ṣiṣe larvicidal ti o lagbara ni ifọkansi ti 10 mg/L.Silva et al.67 royin iṣẹ ṣiṣe larvicidal ti rhamnolipid biosurfactant lodi si Ae ni ifọkansi ti 1 g/L.Aedes Egipti.Kanakdande et al.68 royin pe awọn biosurfactants lipopeptide ti a ṣe nipasẹ Bacillus subtilis fa iku gbogbogbo ni idin Culex ati awọn termites pẹlu ida lipophilic ti Eucalyptus.Bakanna, Masendra et al.69 royin ant osise (Cryptotermes cynocephalus Light.) Iku ti 61.7% ni lipophilic n -hexane ati EtOAc ida ti E. robi jade.
Parthipan et al 70 royin lilo ipakokoro ti awọn biosurfactants lipopeptide ti a ṣe nipasẹ Bacillus subtilis A1 ati Pseudomonas stutzeri NA3 lodi si Anopheles Stephensi, fekito ti Plasmodium parasite iba.Wọn ṣe akiyesi pe idin ati awọn pupae wa laaye fun igba pipẹ, wọn ni awọn akoko oviposition kuru, aibikita, ati awọn igbesi aye kukuru nigba itọju pẹlu oriṣiriṣi awọn ifọkansi ti biosurfactants.Awọn iye LC50 ti a ṣe akiyesi ti B. subtilis biosurfactant A1 jẹ 3.58, 4.92, 5.37, 7.10 ati 7.99 mg/L fun awọn ipinlẹ idin oriṣiriṣi (ie idin I, II, III, IV ati pupae ipele) lẹsẹsẹ.Ni ifiwera, awọn biosurfactants fun awọn ipele idin I-IV ati awọn ipele pupal ti Pseudomonas stutzeri NA3 jẹ 2.61, 3.68, 4.48, 5.55 ati 6.99 mg/L, lẹsẹsẹ.Ẹkọ-jinlẹ ti idaduro ti awọn idin ti o ye ati awọn pupae ni a ro pe o jẹ abajade ti ẹkọ-ẹkọ ti ẹkọ-ara ati awọn idamu ti iṣelọpọ ti o ṣẹlẹ nipasẹ awọn itọju ipakokoro71.
Wickerhamomyces anomalus igara CCMA 0358 ṣe agbejade biosurfactant kan pẹlu iṣẹ larvicidal 100% lodi si awọn efon Aedes.aegypti 24-wakati aarin 38 ga ju ti a royin nipasẹ Silva et al.Biosurfactant ti a ṣe lati Pseudomonas aeruginosa nipa lilo epo sunflower gẹgẹbi orisun erogba ti han lati pa 100% ti idin laarin awọn wakati 48 67.Abinaya et al.72 ati Pradhan et al.73 tun ṣe afihan larvicidal tabi ipakokoro ti awọn surfactants ti a ṣe nipasẹ ọpọlọpọ awọn iyasọtọ ti iwin Bacillus.Iwadi ti a tẹjade tẹlẹ nipasẹ Senthil-Nathan et al.ri pe 100% ti idin efon ti o farahan si awọn adagun ọgbin ni o le ku.74.
Ṣiṣayẹwo awọn ipa abẹlẹ ti awọn ipakokoropaeku lori isedale kokoro jẹ pataki fun awọn eto iṣakoso kokoro ti a ṣepọ nitori awọn abere / ifọkansi sublethal ko pa awọn kokoro ṣugbọn o le dinku awọn olugbe kokoro ni awọn iran iwaju nipa didamu awọn abuda isedale10.Siqueira et al.Idin ipele ti Aedes aegypti igara.Wọn ṣe itupalẹ awọn ipa ti akoko si iku ati awọn ifọkansi abele lori iwalaaye idin ati iṣẹ ṣiṣe odo.Ni afikun, wọn ṣe akiyesi idinku ni iyara odo lẹhin awọn wakati 24-48 ti ifihan si awọn ifọkansi sublethal ti biosurfactant (fun apẹẹrẹ, 50 mg/mL ati 100 mg/mL).Awọn majele ti o ni awọn ipa abẹlẹ ti o ni ileri ni a ro pe o munadoko diẹ sii ni jijẹ ibajẹ pupọ si awọn ajenirun ti o han76.
Awọn akiyesi itan-akọọlẹ ti awọn abajade wa fihan pe awọn biosurfactants ti a ṣe nipasẹ Enterobacter cloacae SJ2 ni pataki paarọ awọn tissu ti ẹfọn (Cx. quinquefasciatus) ati idin termite (O. obesus).Awọn aiṣedeede ti o jọra ni o ṣẹlẹ nipasẹ awọn igbaradi ti epo basil ni An.gambiaes.s ati An.arabica won se apejuwe nipa Ochola77.Kamaraj et al.78 tun ṣe apejuwe awọn aiṣedeede ti ara ẹni kanna ni An.Awọn idin Stephanie ti farahan si awọn ẹwẹ titobi wura.Vasantha-Srinivasan et al.79 tun royin pe apamọwọ oluso-agutan ti o ṣe pataki epo ti bajẹ iyẹwu ati awọn ipele epithelial ti Aedes albopictus.Aedes Egipti.Raghavendran et al royin pe a ṣe itọju idin efon pẹlu 500 mg/ml mycelial extract of a local Penicillium fungus.Ae fihan àìdá histological bibajẹ.Egipti ati Cx.Oṣuwọn iku 80. Ni iṣaaju, Abinaya et al.Idin instar kẹrin ti An ni a ṣe iwadi.Stephensi ati Ae.aegypti ri ọpọlọpọ awọn iyipada itan-akọọlẹ ni Aedes aegypti ti a tọju pẹlu B. licheniformis exopolysaccharides, pẹlu cecum inu, atrophy iṣan, ibajẹ ati isọdọtun ti okun iṣan ganglia72.Gẹgẹbi Raghavendran et al., Lẹhin itọju pẹlu P. daleae mycelial extract, awọn sẹẹli midgut ti awọn efon ti a ṣe idanwo (4th instar larvae) fihan wiwu ti lumen intestinal, idinku ninu awọn akoonu intercellular, ati iparun degeneration81.Awọn iyipada itan-akọọlẹ kanna ni a ṣe akiyesi ni awọn idin efon ti a tọju pẹlu jade ewe echinacea, ti o nfihan agbara insecticidal ti awọn agbo ogun ti a tọju50.
Lilo software ECOSAR ti gba idanimọ agbaye82.Iwadi lọwọlọwọ ṣe imọran pe majele nla ti ECOSAR biosurfactants si microalgae (C. vulgaris), ẹja ati fleas omi (D. magna) ṣubu laarin ẹka “majele” ti asọye nipasẹ United Nations83.Awoṣe ecotoxicity ECOSAR nlo SAR ati QSAR lati ṣe asọtẹlẹ majele ti majele ati igba pipẹ ti awọn nkan ati nigbagbogbo lo lati ṣe asọtẹlẹ majele ti awọn idoti Organic82,84.
Paraformaldehyde, iṣuu soda fosifeti (pH 7.4) ati gbogbo awọn kemikali miiran ti a lo ninu iwadi yii ni a ra lati awọn Laboratories HiMedia, India.
Iṣelọpọ Biosurfactant ni a ṣe ni 500 milimita Erlenmeyer awọn flasks ti o ni 200 milimita ti alabọde Bushnell Haas asan ni afikun pẹlu 1% epo robi gẹgẹbi orisun erogba atẹlẹsẹ.Aṣaju ti Enterobacter cloacae SJ2 (1.4 × 104 CFU/ml) ni a fi sii ati gbin lori gbigbọn orbital ni 37°C, 200 rpm fun awọn ọjọ meje.Lẹhin akoko isubu, biosurfactant ti fa jade nipasẹ centrifuging alabọde aṣa ni 3400×g fun iṣẹju 20 ni 4°C ati pe a lo supernatant ti o yọrisi fun awọn idi iboju.Awọn ilana iṣapeye ati ijuwe ti biosurfactants ni a gba lati inu iwadi wa tẹlẹ26.
Culex quinquefasciatus idin ni a gba lati Ile-iṣẹ fun Ikẹkọ Ilọsiwaju ni Imọ-jinlẹ Omi (CAS), Palanchipetai, Tamil Nadu (India).Idin ni a dagba ni awọn apoti ṣiṣu ti o kun fun omi ti a ti sọ diionized ni 27 ± 2 ° C ati akoko fọto ti 12:12 (ina: dudu).Idin ẹfọn ni a fun ni ojutu glukosi 10% kan.
Culex quinquefasciatus idin ni a ti rii ni ṣiṣi ati awọn tanki septic ti ko ni aabo.Lo awọn itọnisọna isọdi boṣewa lati ṣe idanimọ ati idin ti aṣa ni yàrá-yàrá85.Awọn idanwo larvicidal ni a ṣe ni ibamu pẹlu awọn iṣeduro ti Ajo Agbaye ti Ilera 86.SH.Idin instar kẹrin ti quinquefasciatus ni a gba ni awọn tubes pipade ni awọn ẹgbẹ ti 25 milimita ati 50 milimita pẹlu aafo afẹfẹ ti idamẹta meji ti agbara wọn.Biosurfactant (0-50 mg/ml) ni a fi kun si ọpọn kọọkan ni ẹyọkan ati ti a fipamọ ni 25 °C.Awọn tube iṣakoso lo nikan distilled omi (50 milimita).Awọn idin ti o ku ni a kà si awọn ti ko ṣe afihan awọn ami ti odo ni akoko igbaduro (wakati 12-48) 87.Ṣe iṣiro ipin ogorun iku idin ni lilo idogba.(1)88.
Idile Odontotermidae pẹlu terite India Odontotermes obesus, ti a rii ni awọn igi rotting ni Ile-iṣẹ Agricultural (Ile-ẹkọ giga Annamalai, India).Ṣe idanwo biosurfactant yii (0-50 mg/ml) ni lilo awọn ilana deede lati pinnu boya o jẹ ipalara.Lẹhin gbigbe ni ṣiṣan afẹfẹ laminar fun awọn iṣẹju 30, ṣiṣan kọọkan ti iwe Whatman ni a bo pẹlu biosurfactant ni ifọkansi ti 30, 40, tabi 50 mg / ml.Awọn ila iwe ti a ti ṣaju ati ti a ko bo ni idanwo ati fiwewe ni aarin satelaiti Petri kan.Kọọkan petri satelaiti ni nipa ọgbọn lọwọ termites O. obesus.Iṣakoso ati awọn termites idanwo ni a fun ni iwe tutu bi orisun ounje.Gbogbo awọn awo ni a tọju ni iwọn otutu yara jakejado akoko isubu.Awọn akoko ku lẹhin 12, 24, 36 ati 48 wakati 89,90.Idogba 1 lẹhinna ni a lo lati ṣe iṣiro ipin ogorun ti iku iku ni oriṣiriṣi awọn ifọkansi biosurfactant.(2).
Awọn ayẹwo ni a tọju sori yinyin ati ki o ṣajọpọ ni awọn microtubes ti o ni 100 milimita ti 0.1 M sodium phosphate buffer (pH 7.4) ati firanṣẹ si Central Aquaculture Pathology Laboratory (CAPL) ti Ile-iṣẹ Rajiv Gandhi fun Aquaculture (RGCA).Histology yàrá, Sirkali, Mayiladuthurai.Agbegbe, Tamil Nadu, India fun itupalẹ siwaju.Awọn ayẹwo ni a ṣe atunṣe lẹsẹkẹsẹ ni 4% paraformaldehyde ni 37 ° C fun awọn wakati 48.
Lẹhin ipele imuduro, ohun elo naa ni a fọ ​​ni igba mẹta pẹlu 0.1 M sodium phosphate buffer (pH 7.4), ni ipele ti o gbẹ ni ethanol ati fi sinu resini LEICA fun awọn ọjọ 7.Lẹhinna a gbe nkan naa sinu apẹrẹ ike kan ti o kun fun resini ati polymerizer, ati lẹhinna gbe sinu adiro ti o gbona si 37 ° C titi ti bulọọki ti o ni nkan naa yoo jẹ polymerized patapata.
Lẹhin polymerization, awọn ohun amorindun ti ge nipa lilo microtome LEICA RM2235 (Rankin Biomedical Corporation 10,399 Enterprise Dr. Davisburg, MI 48,350, USA) si sisanra ti 3 mm.Awọn apakan ti wa ni akojọpọ lori awọn ifaworanhan, pẹlu awọn apakan mẹfa fun ifaworanhan.A ti gbẹ awọn ifaworanhan ni iwọn otutu yara, lẹhinna ni abawọn pẹlu hematoxylin fun awọn iṣẹju 7 ati fo pẹlu omi ṣiṣan fun iṣẹju 4.Ni afikun, lo ojutu eosin si awọ ara fun iṣẹju 5 ki o fi omi ṣan pẹlu omi ṣiṣan fun awọn iṣẹju 5.
Asọtẹlẹ majele ti o buruju ni lilo awọn ohun alumọni omi lati oriṣiriṣi awọn ipele otutu: 96-wakati ẹja LC50, 48-wakati D. magna LC50, ati 96-wakati alawọ ewe EC50.Majele ti awọn biosurfactants rhamnolipid si ẹja ati ewe alawọ ewe ni a ṣe ayẹwo nipa lilo ẹyà sọfitiwia ECOSAR 2.2 fun Windows ti o dagbasoke nipasẹ Ile-iṣẹ Idaabobo Ayika AMẸRIKA.(Wa lori ayelujara ni https://www.epa.gov/tsca-screening-tools/ecological-struct-activity-relationships-ecosar-predictive-model).
Gbogbo awọn idanwo fun larvicidal ati iṣẹ antitermite ni a ṣe ni ẹẹta mẹta.Ipadabọ aiṣedeede (logi ti awọn oniyipada idahun iwọn lilo) ti idin ati data iku iku ni a ṣe lati ṣe iṣiro ifọkansi apaniyan agbedemeji (LC50) pẹlu aarin igbẹkẹle 95%, ati awọn iha esi ifọkansi ti ipilẹṣẹ ni lilo Prism® (ẹya 8.0, Software GraphPad) Inc., USA) 84, 91.
Iwadii ti o wa lọwọlọwọ n ṣe afihan agbara ti microbial biosurfactants ti a ṣe nipasẹ Enterobacter cloacae SJ2 gẹgẹbi awọn apanirun efon ati awọn aṣoju antitermite, ati pe iṣẹ yii yoo ṣe alabapin si oye ti o dara julọ ti awọn ilana ti larvicidal ati antitermite.Awọn ẹkọ itan-akọọlẹ ti awọn idin ti a tọju pẹlu awọn biosurfactants ṣe afihan ibajẹ si apa ti ngbe ounjẹ, midgut, cortex cerebral ati hyperplasia ti awọn sẹẹli epithelial intestinal.Awọn abajade: Ayẹwo toxicological ti antitermite ati iṣẹ larvicidal ti rhamnolipid biosurfactant ti a ṣe nipasẹ Enterobacter cloacae SJ2 fi han pe ipinya yii jẹ biopesticide ti o pọju fun iṣakoso awọn arun ti awọn efon (Cx quinquefasciatus) ati awọn termites (O. obesus).iwulo wa lati loye majele ti ayika ti awọn ohun elo biosurfactants ati awọn ipa ayika ti o pọju wọn.Iwadi yii n pese ipilẹ imọ-jinlẹ fun ṣiṣe iṣiro eewu ayika ti awọn biosurfactants.