ìbéèrèbg

Fọ́sífórílísó náà ń mú kí olùṣàkóso ìdàgbàsókè DELLA ṣiṣẹ́ nínú Arabidopsis nípa gbígbé ìsopọ̀ histone H2A pẹ̀lú chromatin lárugẹ.

Àwọn ọlọjẹ DELLA jẹ́ olórí tí a tọ́júawọn olutọsọna idagbasoketí ó kó ipa pàtàkì nínú ṣíṣàkóso ìdàgbàsókè ewéko ní ìdáhùn sí àwọn àmì inú àti àyíká. DELLA ń ṣiṣẹ́ gẹ́gẹ́ bí olùṣàkóso ìkọ̀wé àti pé a yàn án láti fojúsùn àwọn olùgbékalẹ̀ nípa dídi mọ́ àwọn ohun tí a fi ń kọ ìtàn (TFs) àti histone H2A nípasẹ̀ agbègbè GRAS rẹ̀. Àwọn ìwádìí tuntun ti fihàn pé ìdúróṣinṣin DELLA ni a ń ṣe àkóso lẹ́yìn ìtumọ̀ nípasẹ̀ àwọn ọ̀nà méjì: polyubiquitination tí phytohormone gibberellin fà, èyí tí ó ń yọrí sí ìbàjẹ́ kíákíá rẹ̀, àti ìsopọ̀ àwọn àtúnṣe bí ubiquitin kékeré (SUMO) láti mú kí ìkórajọpọ̀ rẹ̀ pọ̀ sí i. Ní àfikún, iṣẹ́ DELLA ni a ń ṣe àkóso nípasẹ̀ glycosylations méjì tí ó yàtọ̀: ìbáṣepọ̀ DELLA-TF ni a mú pọ̀ sí i nípasẹ̀ O-fucosylation ṣùgbọ́n tí a ń dènà nípasẹ̀ àtúnṣe O-linked N-acetylglucosamine (O-GlcNAc). Síbẹ̀síbẹ̀, ipa ti DELLA phosphorylation kò tíì yé kedere, nítorí àwọn ìwádìí ìṣáájú ti fi àwọn àbájáde tí ó takora hàn, láti àwọn tí ó fihàn pé phosphorylation ń gbé ìbàjẹ́ DELLA sókè tàbí dínkù sí àwọn mìíràn tí ó fihàn pé phosphorylation kò ní ipa lórí ìdúróṣinṣin rẹ̀. Níbí, a ṣàfihàn àwọn ibi phosphorylation nínú REPRESSORga1-3(RGA, AtDELLA) tí a wẹ̀ mọ́ kúrò nínú Arabidopsis thaliana nípa lílo ìṣàyẹ̀wò mass spectrometry, ó sì fihàn pé phosphorylation ti àwọn peptides RGA méjì ní agbègbè PolyS àti PolyS/T ń gbé ìsopọ̀ H2A àti ìṣiṣẹ́ RGA lárugẹ. Ìsopọ̀ RGA pẹ̀lú àwọn olùgbékalẹ̀ àfojúsùn. Lóòótọ́, phosphorylation kò ní ipa lórí ìbáṣepọ̀ RGA-TF tàbí ìdúróṣinṣin RGA. Ìwádìí wa fi ìlànà molecule tí phosphorylation fi ń fa ìṣiṣẹ́ DELLA hàn.
Láti ṣàlàyé ipa ti phosphorylation nínú ṣíṣàkóso iṣẹ́ DELLA, ó ṣe pàtàkì láti dá àwọn ibi phosphorylation DELLA mọ̀ ní vivo kí a sì ṣe àwọn ìwádìí iṣẹ́ nínú àwọn ewéko. Nípa ìwẹ̀nùmọ́ àwọn ohun ọ̀gbìn tí a yọ jáde pẹ̀lú ìwádìí MS/MS, a ṣàwárí ọ̀pọ̀lọpọ̀ phosphosites nínú RGA. Lábẹ́ àwọn ipò àìtó GA, phosphorylation RHA ń pọ̀ sí i, ṣùgbọ́n phosphorylation kò ní ipa lórí ìdúróṣinṣin rẹ̀. Pàtàkì, àwọn àyẹ̀wò co-IP àti ChIP-qPCR fihàn pé phosphorylation ní agbègbè PolyS/T ti RGA ń gbé ìbáṣepọ̀ rẹ̀ pẹ̀lú H2A àti ìbáṣepọ̀ rẹ̀ pẹ̀lú àwọn olùgbékalẹ̀ àfojúsùn lárugẹ, èyí tí ó ń fi ọ̀nà tí phosphorylation fi ń fa iṣẹ́ RGA hàn.
A gba RGA lati fojusi chromatin nipasẹ ibaraenisepo ti agbegbe LHR1 pẹlu TF lẹhinna o so mọ H2A nipasẹ agbegbe PolyS/T rẹ ati subdomain PFYRE, o ṣẹda eka H2A-RGA-TF lati mu RGA duro. Phosphorylation ti Pep 2 ni agbegbe PolyS/T laarin agbegbe DELLA ati domain GRAS nipasẹ kinase ti a ko mọ mu ki asopọ RGA-H2A pọ si. Protein mutant rgam2A pa phosphorylation RGA run o si gba isọdi amuaradagba ti o yatọ lati da asopọ H2A duro. Eyi yọrisi idinku awọn ibaraenisepo TF-rgam2A ti o wa ni igba diẹ ati pipin rgam2A kuro ninu chromatin afojusun. Nọmba yii ṣe afihan titẹ transcriptional ti RGA nikan. A le ṣapejuwe apẹẹrẹ kanna fun imuṣiṣẹ transcriptional ti RGA, ayafi pe eka H2A-RGA-TF yoo ṣe igbelaruge transcriptional jiini afojusun ati dephosphorylation ti rgam2A yoo dinku transcription. Aworan ti a yipada lati Huang et al.21.
A ṣe àyẹ̀wò gbogbo data iye ni iṣiro nipa lilo Excel, a sì pinnu awọn iyatọ pataki nipa lilo idanwo t ti ọmọ ile-iwe. A ko lo awọn ọna iṣiro lati pinnu iwọn ayẹwo ni akọkọ. A ko yọ data kuro ninu itupalẹ naa; a ko ṣe idanwo naa laileto; awọn oluwadi ko ṣe akiyesi pinpin data lakoko idanwo naa ati iṣayẹwo awọn abajade naa. Iwọn ayẹwo naa ni a fihan ninu itan aworan ati faili data orisun.
Fún ìwífún síi nípa ìṣètò ìwádìí náà, wo Àkótán Ìròyìn Àkójọpọ̀ Natural Portfolio tí ó níí ṣe pẹ̀lú àpilẹ̀kọ yìí.
A ti fi data proteomics Mass spectrometry kun ProteomeXchange consortium nipasẹ ibi ipamọ alabaṣepọ PRIDE66 pẹlu idanimọ data PXD046004. Gbogbo data miiran ti a gba lakoko iwadi yii ni a gbekalẹ ninu Alaye Afikun, Awọn faili Data Afikun, ati Awọn faili Data Raw. A pese data orisun fun nkan yii.

 

Àkókò ìfìwéránṣẹ́: Oṣù kọkànlá-08-2024