Ohun ọgbin ati awọn ohun elo kokoro-arun
Dókítà Pat Brown ní Yunifásítì Illinois (tó wà ní UC Davis báyìí) ló pèsè àkójọ àwọn oríṣiríṣi ìlà tí a mọ̀ sí sorghum conversion population (SCP). A ti ṣàlàyé rẹ̀ tẹ́lẹ̀, ó sì jẹ́ àkójọ onírúurú ìlà tí a yípadà sí photoperiod-insensitivity àti kékeré gíga láti mú kí ìdàgbàsókè àti ìdàgbàsókè àwọn ewéko rọrùn ní àwọn agbègbè Amẹ́ríkà. A lo ìlà 510 láti inú iye ènìyàn yìí nínú ìwádìí yìí, bó tilẹ̀ jẹ́ pé nítorí ìdàgbàsókè tí kò dára àti àwọn ọ̀ràn ìṣàkóso dídára mìíràn, kì í ṣe gbogbo ìlà ni a lò nínú ìwádìí gbogbo àwọn ànímọ́ mẹ́ta náà. Níkẹyìn, a lo ìwádìí láti inú ìlà 345 fún ìwádìí ìdáhùn chitin, ìlà 472 fún ìdáhùn flg22, àti 456 fún ìdènà TLS.B. kukieiWọ́n gba irú LSLP18 láti ọwọ́ Dókítà Burt Bluhm ní Yunifásítì Arkansas.
Ìwọ̀n ìdáhùn MAMP
A lo MAMPs meji oriṣiriṣi ninu iwadi yii flg22, (Genscript catalog # RP19986), ati chitin. A gbin awọn irugbin oka sinu awọn ifibọ ti a gbe sori awọn ile ti a fi ilẹ kun (33% Sunshine Redi-Earth Pro Growing Mix) ninu ile eefin. A fun awọn irugbin ni omi ni ọjọ kan ṣaaju gbigba awọn ayẹwo lati yago fun ọrinrin afikun ni ọjọ gbigba.
Wọ́n ṣe àwọn ìlà náà láìròtẹ́lẹ̀, wọ́n sì gbìn wọ́n sí àwọn ìlà 60. Fún ìlà kọ̀ọ̀kan, wọ́n gbìn “ìkòkò” mẹ́ta pẹ̀lú irúgbìn méjì fún ìlà kọ̀ọ̀kan. Wọ́n gbìn àwọn ìlà tó tẹ̀lé e lẹ́yìn náà ní kété tí wọ́n ti ṣe àgbékalẹ̀ àwọn ìlà tó ṣáájú títí tí gbogbo ènìyàn yóò fi rí i. Wọ́n ṣe àwọn ìwádìí méjì fún MAMP méjèèjì pẹ̀lú àwọn genotypes tí a tún ṣe àtúnṣe nínú ọ̀kọ̀ọ̀kan àwọn ìṣàn méjèèjì.
A ṣe àwọn àyẹ̀wò ROS gẹ́gẹ́ bí a ti ṣàlàyé tẹ́lẹ̀. Ní kúkúrú, fún ìlà kọ̀ọ̀kan, a gbìn irúgbìn mẹ́fà sínú ìkòkò mẹ́ta ọ̀tọ̀ọ̀tọ̀. Láti inú àwọn èso tí ó jáde, a yan mẹ́ta ní ìbámu pẹ̀lú ìbáramu. Àwọn èso tí ó dàbí ohun àjèjì tàbí tí ó ga tàbí kúrú ju ọ̀pọ̀lọpọ̀ lọ ni a kò lò. A yọ àwọn disiki ewé mẹ́rin tí ó ní ìwọ̀n 3 mm láti apá gbígbòòrò jùlọ ti ewé kẹrin ti àwọn igi ọ̀gbìn ọ̀gbìn mẹ́ta ọ̀tọ̀ọ̀tọ̀ tí ó ti wà fún ọjọ́ mẹ́ẹ̀ẹ́dógún. Disiki kan fún ewé kan láti inú ewé méjì àti disiki méjì láti inú ewé kan, pẹ̀lú disiki kejì tí ó di ìṣàkóso omi (wo ìsàlẹ̀). A gbé àwọn disiki náà léfòó lórí 50 µl H20 ní àwo dúdú 96 kan, a fi èdìdì aluminiomu dí i láti yẹra fún ìfarahàn sí ìmọ́lẹ̀, a sì pa wọ́n mọ́ ní ìwọ̀n otútù yàrá ní alẹ́. Ní òwúrọ̀ ọjọ́ kejì, wọ́n ṣe àtúnṣe àtúnṣe nípa lílo 2 mg/ml chemiluminescent probe L-012 (Wako, katalogi # 120-04891), 2 mg/ml horseradish peroxidase (Iru VI-A, Sigma-Aldrich, katalogi # P6782), àti 100 mg/ml Chitin tàbí 2 μM ti Flg22. A fi 50 µl ti àtúnṣe àtúnṣe yìí kún mẹ́ta nínú àwọn kànga mẹ́rin náà. Kànga kẹrin jẹ́ àtúnṣe àtúnṣe àtúnṣe, èyí tí a fi àtúnṣe ...
Lẹ́yìn tí a fi ojutu iṣipopada kun un, a wọn imọlẹ ina nipa lilo SynergyTM 2 multi-detection microplate reader (BioTek) ni gbogbo iṣẹju meji fun wakati kan. Awo oluka naa n ṣe awọn wiwọn luminescence ni gbogbo iṣẹju meji lakoko wakati kan yii. A ṣe iṣiro apapọ gbogbo awọn kika 31 lati fun ni iye fun kanga kọọkan. A ṣe iṣiro iye ti a ṣe iṣiro fun idahun MAMP fun genotype kọọkan bi (iye luminescence apapọ ti awọn kanga idanwo mẹta—iye kanga mock) - iyokuro iye kanga ofo apapọ. Awọn iye kanga ofo naa sunmọ odo nigbagbogbo.
Àwọn díìsì ìwé tiNicotiana bentamiana, ìlà oka kan tó ń dáhùn sí ohùn gíga (SC0003), àti ìlà oka kan tó ń dáhùn sí ohùn kékeré (PI 6069) ni a tún fi kún gẹ́gẹ́ bí ìṣàkóso nínú àwo kọ̀ọ̀kan tó ní ihò 96 fún ète ìṣàkóso dídára.
B. kukieiÌmúrasílẹ̀ àti ìtọ́jú ...
B. kukieiA se inoculum gẹ́gẹ́ bí a ti ṣàlàyé rẹ̀ tẹ́lẹ̀. Ní kúkúrú, a fi omi wẹ̀ ọkà ọkà fún ọjọ́ mẹ́ta, a fi omi wẹ̀ ẹ́, a fi sínú ìgò onígun 1 L, a sì fi sínú abẹ́rẹ́ fún wákàtí kan ní 15psi àti 121 °C. Lẹ́yìn náà, a fi nǹkan bí 5 milimita mycelia tí a ti yọ kúrò nínú àṣà tuntun sí àwọn ọkà náà.B. kukieiA yọ LSLP18 kuro, a sì fi sílẹ̀ fún ọ̀sẹ̀ méjì ní iwọ̀n otútù yàrá, a ń gbọn àwọn ìgò náà ní gbogbo ọjọ́ mẹ́ta. Lẹ́yìn ọ̀sẹ̀ méjì, a gbẹ àwọn ọkà ọkà tí ó ti kó sínú olu, a sì tọ́jú wọn sí i ní iwọ̀n otútù 4°C títí a ó fi ṣe ìtọ́jú nínú oko. A lo inoculum kan náà fún gbogbo ìdánwò náà, a sì ń sọ ọ́ di tuntun ní ọdọọdún. Fún ìtọ́jú, a fi àwọn ọkà mẹ́fà sí mẹ́wàá tí ó ti kó sínú gbogbo igi ọkà tí ó ti tó ọ̀sẹ̀ mẹ́rin sí márùn-ún. Àwọn spores tí a mú láti inú olu wọ̀nyí bẹ̀rẹ̀ sí í kó àrùn nínú àwọn igi ọkà kékeré láàárín ọ̀sẹ̀ kan.
Ìmúrasílẹ̀ irúgbìn
Kí a tó gbìn irúgbìn ọkà sí oko, a fi oògùn olóró, oògùn ìpakúpa, àti àdàpọ̀ tó ní ~ 1% Spirato 480 FS fungicide, 4% Sebring 480 FS fungicide, 3% Sorpro 940 ES fungicide. Lẹ́yìn náà, a fi afẹ́fẹ́ gbẹ irúgbìn náà fún ọjọ́ mẹ́ta, èyí tó fún wọn ní àwọ̀ díẹ̀díẹ̀ lórí irúgbìn náà. Èyí tó sì ṣe ààbò náà gba ààyè láti lo oògùn olóró Dual Magnum gẹ́gẹ́ bí ìtọ́jú kí ó tó yọjú.
Ìṣàyẹ̀wò ìdènà Àmì Àfojúsùn
Wọ́n gbìn SCP ní Central Crops Research Station ní Clayton, NC ní ọjọ́ kẹrìnlá sí ọjọ́ karùndínlógún oṣù kẹfà ọdún 2017 àti ọjọ́ ogún oṣù kẹfà ọdún 2018 nínú àwòrán bulọọki pípé tí a ṣe láìṣe àtúnṣe méjì nínú ọ̀ràn kọ̀ọ̀kan. Wọ́n gbìn àwọn àyẹ̀wò náà sí orí ìlà kan ṣoṣo tí ó tó m 1.8 pẹ̀lú ìwọ̀n ìlà 0.9 m nípa lílo irúgbìn mẹ́wàá fún ilẹ̀ kọ̀ọ̀kan. Wọ́n gbìn orí ìlà méjì ní ẹ̀gbẹ́ ìdánwò kọ̀ọ̀kan láti dènà àwọn ipa etí. Àwọn àyẹ̀wò náà ni a fún ní abẹ́rẹ́ ní ọjọ́ ogún oṣù keje ọdún 2017 àti ọjọ́ ogún oṣù keje ọdún 2018 níbi tí àwọn igi ọkà náà wà ní ìpele ìdàgbàsókè kẹta. Wọ́n gba ìwọ̀n náà lórí ìwọ̀n kan sí mẹ́sàn-án, níbi tí a ti gba àwọn igi tí kò ní àmì àrùn kankan bí a ṣe gba àwọn igi mẹ́sàn-án tí ó ti kú pátápátá gẹ́gẹ́ bí ọ̀kan. A gba ìwọ̀n méjì ní ọdún 2017 àti ìwọ̀n mẹ́rin ní ọdún 2018 bẹ̀rẹ̀ ní ọ̀sẹ̀ méjì lẹ́yìn ìfúnni ní ọdún kọ̀ọ̀kan. A ṣírò sAUDPC (agbègbè tí a ṣe àtúnṣe lábẹ́ ìlà ìlọsíwájú àrùn) gẹ́gẹ́ bí a ti ṣàlàyé tẹ́lẹ̀.
Àkókò ìfìwéránṣẹ́: Oṣù Kẹrin-01-2021